De grootste kennisbank van het HBO

Inspiratie op jouw vakgebied

Vrij toegankelijk

Terug naar zoekresultatenDeel deze publicatie

Automatisering van de Speciële Immunologie van de AKCL

Rechten: Alle rechten voorbehouden

Automatisering van de Speciële Immunologie van de AKCL

Rechten: Alle rechten voorbehouden

Samenvatting

Met behulp van het DSX systeem worden interne ELISA bepalingen geautomatiseerd en externe
bepalingen geïmplementeerd op de speciële immunologie. Deze automatisering heeft voornamelijk
een tijdsbesparing met “walk away” automatisering tot doel. Deze automatisering verbreedt ook het
aantal analisten dat deze bepalingen kan uitvoeren en standaardiseert de uitvoering. Op deze manier
wordt het analysepakket uitgebreid en wordt de afdeling toekomstbestendig gehouden.
Om garant te staan voor de kwaliteit van het analysepakket en de patiëntenzorg worden deze
bepalingen gevalideerd. Tijdens een validatie wordt aan de hand van een aantal analytische en
klinische parameters bepaald of een methode onder praktijkomstandigheden voldoet aan vooraf
gestelde criteria.
De implementatie van ELISA’s op het DSX systeem is verdeeld in een aantal stappen. Eerst wordt een
DSX protocol (ASSAY) geschreven en worden monsters verzameld, eventueel al gemeten met een
referentiemethode. Vervolgens wordt de correlatie van de DSX met de manuele uitvoering van
dezelfde ELISA en de referentiemethode bepaald. Vervolgens wordt het vooraf geschreven
validatieplan uitgevoerd. Bij een geslaagde validatie wordt tenslotte de SOP geschreven of aangepast
indien de bepaling enkel overgezet is op de DSX.
De anti-C1q voldoet deels aan de validatiecriteria. Een methodevergelijking met de
referentiemethode moet de cut-off waarde nog verifiëren. De FGF-21 en complementactiviteitsbepalingen
op de DSX vertonen goede correlatie met de manuele uitvoering. De anti-MuSK, leptine
en adiponectine vertonen tevens goede correlatie en validatie moet worden vervolgd met
methodevergelijking met de verschillende RIA methodes.
Temperatuurvariatie (23 - 31°C) in de incubatoren op kamertemperatuur en onvoldoende mengen
door het lineaire schudden zijn twee duidelijke beperkingen van de DSX. Dit draagt waarschijnlijk bij
aan de slechte correlatie met de manuele uitvoering bij de anti-GAD en IL-6.
De DSX geeft bij alle geïmplementeerde ELISA’s een hogere OD bij monsters en in veel gevallen ook
bij controles en standaarden. Dit wordt waarschijnlijk veroorzaakt tijdens de conjugaat en substraat
incubaties. Acht van de verschillende ELISA’s gebruiken Horse Radish Peroxydase (HRP) als conjugaat
en tetramethylbenzidine (TMB) als substraat. Daarnaast gebruiken drie ELISA’s alkaline fosfatase als
conjugaat, waarvan twee methoden p-nitrofenolfosfaat (PNPP) gebruiken als substraat. De derde
ELISA met alkaline fosfatase gebruikt NADPH.
HRP vertoont een stijging in activiteit tot de activiteit de piek bereikt op 45 - 50°C. Alkalische
fosfatase in combinatie met PNPP als substraat heeft een optimum temperatuur van 37°C.
Deze hypothese is getest door bij de anti-GAD de manuele incubatie te wijzigen met een verhoogde
temperatuur, omdat de DSX geen opties heeft om de temperatuur te verlagen. De anti-GAD bepaling
functioneert echter om andere redenen niet op de DSX. De hypothese moet met een ELISA worden
uitgetest die een goede correlatie vertoont tussen de DSX en de manuele uitvoering.
Voor optimaal gebruik van de DSX is koppeling met het patiënten datasysteem en de Revelation
software van de DSX gewenst. Dit verminderd de foutgevoeligheid van het handmatig invoeren en
het bespaart tijd. Binnenkort wordt deze koppeling opgezet.

Toon meer
OrganisatieAvans Hogeschool
OpleidingBiologie en Medisch Laboratoriumonderzoek-Breda
AfdelingATGM Academie voor de technologie van Gezondheid en Milieu
PartnersLeids Universitair Medisch Centrum (LUMC), Afdeling Klinische Chemie en Laboratorium Geneeskunde (AKCL)
Datum2014-08-11
TypeBachelor
TaalNederlands

Op de HBO Kennisbank vind je publicaties van 26 hogescholen

De grootste kennisbank van het HBO

Inspiratie op jouw vakgebied

Vrij toegankelijk